Herkes çok fazla laboratuvar olduğunu biliyor, bu yüzden kaç kişi PCR laboratuvarları hakkında biliyor? Ve PCR laboratuarlarının tasarımı için temel gereksinimler nelerdir? Sonra herkesle görüşmek üzere VOLAB Xiaobian olacak ~
1, PCR laboratuvar düzeni
PCR amplifikasyon test laboratuvarı prensip olarak dört ayrı çalışma alanına ayrılmıştır: reaktif depolama ve hazırlama alanı, numune hazırlama alanı, amplifikasyon reaksiyonu karışımı preparasyonu ve amplifikasyon alanı ve amplifikasyon ürünü analiz alanı. Çapraz kontaminasyondan kaçınmak için, her çalışma alanına girmek, sadece reaktif depolama ve hazırlama alanı → örnek hazırlama alanı → amplifikasyon reaksiyonu karışımı preparasyonu ve amplifikasyon alanı → amplifikasyon ürün analiz alanı olmak üzere tek bir doğrultuyu kesinlikle takip etmelidir. Her deney bölgesi arasındaki reaktif ve numune aktarımı bir transfer penceresi ile gerçekleştirilmelidir.
2. Laboratuar İklimlendirme Havalandırma Sistemi Tasarımı ve Basınç Kontrolü
PCR laboratuarlarında katı arıtma gereksinimleri yoktur, ancak çeşitli deney alanları arasında çapraz kontaminasyon olasılığını önlemek için tam akışlı bir hava dağıtım sisteminin kullanılması tavsiye edilir. Aynı zamanda, her bir deney alanının basınç gereksinimlerinin karşılanması için gönderme ve tüketme oranı sıkı bir şekilde kontrol edilmelidir.
2.1, örnek hazırlama alanı
Bu alandaki ana işlemler, örneklerin korunması, nükleik asitlerin ekstraksiyonu (RNA, DNA), depolanması ve amplifikasyon reaksiyon tüplerine eklenmesi ve DNA sentezinin belirlenmesidir. Bu alandaki basınç gradyanı gereksinimleri: bitişik alandan bu alana aerosol kontaminasyonunu önlemek için bitişik alana göre pozitif basınçtır. Ek olarak, yükleme işlemi sırasında aerosol kaynaklı kontaminasyon olasılığı nedeniyle, bölgede gereksiz yürüyüşlerden kaçınılmalıdır.
2.2. Reaktif depolama ve hazırlama alanı
Bu deney alanındaki ana işlemler, depolama reaktiflerinin hazırlanması, reaktiflerin dağıtılması ve ana reaksiyon karışımlarının hazırlanmasıdır. Numune hazırlama için kullanılan reaktifler ve materyaller doğrudan bu alana gönderilmeli ve diğer alanlardan geçmemelidir. Reaktif hammaddeleri bu alanda saklanmalı ve alanda gerekli depolama reaktiflerine hazırlanmalıdır. Hava basıncının kontrolü için katı gereklilik yoktur.
2.3, amplifikasyon ürünü analiz alanı
Bu alandaki ana işlem, güçlendirilmiş parçaların belirlenmesidir. Bu alan, amplifiye edilmiş ürünün ana kirlenme kaynağıdır. Bu nedenle, bu alan için basınç gradyan gereksinimleri şunlardır: Amplifiye edilmiş ürünlerin alandan diğer alanlara yayılmasını önlemek için bitişik alana göre negatif basınç.
2.4, amplifikasyon reaksiyonu karışımı hazırlama ve amplifikasyon bölgesi
Bu alandaki ana işlem DNA amplifikasyonu. Ek olarak, hazırlanan DNA şablonunun (örnek hazırlama alanından) ve ana reaksiyon karışımının (reaktif saklama ve hazırlama alanından) bir reaksiyon karışımı hazırlamak için eklenmesi, vb. Bu alanda da gerçekleştirilebilir. Bu alandaki basınç gradyanı gereksinimleri şunlardır: alandan aerosol sızıntısını önlemek için bitişik alana göre negatif basınç. Aerosollerin neden olduğu kirliliği önlemek için bölgede gereksiz yürüyüş en aza indirilmelidir. Örnekleme gibi bireysel işlemler temiz tezgahta yapılmalıdır.
3.1. Çalışma alanının katı bölümü
(1) Her deney alanının ayarı makul;
(2) Her deneysel alan, farklı deneysel alanlardaki ekipman öğeleri ve reaktifler arasındaki karışıklığı önlemek için belirgin işaretlere (çarpıcı ev numaraları veya farklı zemin renkleri vb.) Sahip olmalıdır.
3.2, makul sistem ayarları
(1) Makul havalandırma havalandırma sistemi ayarı, tam gönderimli klima sistemini kullanmaya çalışın;
(2) Katı hava basıncı kontrolü farklı deney alanlarında farklı basınç gereksinimleri sağlar.
3.3, standart işlem
(1) Amplifikasyon kontrol laboratuvarının teknisyenleri, iş başında eğitim almalıdır ve eğitimi geçtikten sonra sadece klinik gen amplifikasyon testlerine katılabilir;
(2) Deney işlemi sırasında operatör eldiven takmalı ve sık sık değiştirmelidir. Ek olarak, kullanım sırasında atılabilir kapakların kullanımı da kirlenmeyi önlemek için etkili bir önlemdir;
(3) Temizlik işi zamanında ve doğrudur. Deneme bittikten sonra, alan derhal temizlenmelidir. Yüzeylerin dezenfekte edilmesi veya ultraviyole lambaların ışınlanması ve dezenfeksiyonu için geleneksel dezenfekte edici sıvılara ek olarak, bazı deney cihazları da yüksek basınçlı sterilizasyona tabi tutulmalıdır.
3.4, sıkı yönetim
(1) Laboratuvara giren ve çıkan personeli kesinlikle kontrol edin. Deneyle ilgisi olmayan kişiler, laboratuvara girmeyecek veya izin vermeyecek ve gerekirse, deney alanının tamamından bağımsız geçişler ve kapılar kuracaklardır.
(2) Çapraz kontaminasyon olasılığını azaltmak için deney alanında gereksiz yürüyüşleri en aza indirir.
(3) Amplifiye edilmiş ürün analiz alanı, amplifiye edilmiş ürünün en önemli kirlenme kaynağıdır. Atık solüsyon laboratuvara boşaltılamaz. Dezenfektan solüsyonuna batırılmış ve daha sonra laboratuvardan uzak bir yere atılmalıdır. Kullanılan ipuçları tek kullanımlıktır. Malzemeler de dezenfekte edilmeli ve sterilize edilmeli ve daha sonra yakma gibi tek biçimli olarak muamele edilmelidir;
(4) Amplifikasyon ürünü analiz alanı, bazı gen mutasyonlarını ve toksik maddeleri kullanabilir ve deneycinin güvenlik korumasına özel dikkat gösterilmelidir.
3.5. Komple laboratuvar tesisleri
Laboratuar destekleme tesisleri, deneysel çalışmanın sağlanması için gerekli şartlardır. İlgili ekipman ve aletler, ultra-temiz tezgahlar, santrifüjler ve örnek besleyiciler gibi her laboratuvarın farklı deneysel içeriğine göre donatılmalıdır.